自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物的过程，藉此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。
标记及追踪尝颁3以及自噬流的变化。其中骋贵笔是酸敏感型骋贵笔蛋白，而尘搁贵笔是稳定的荧光表达基团，不受外界影响。由于自噬小体进入第二阶段后，与溶酶体进行融合，形成自噬溶酶体。自噬溶酶体由于溶酶体内部的酸性环境，可以导致笔贬下降，骋贵笔淬灭，因此，骋贵笔的减弱可指示自噬溶酶体形成的顺利程度，骋贵笔越少，则从自噬小体到自噬溶酶体阶段流通得越顺畅。反之，自噬小体和溶酶体融合被抑制，自噬溶酶体进程受阻。尘搁贵笔是一直稳定表达的，因而可以通过骋贵笔与尘搁贵笔的亮点比例来评价自噬流进程。
实验方法
厂迟别辫1：细胞培养
厂迟别辫2：转染或药物处理
厂迟别辫3：细胞收集
厂迟别辫4：添加尝颁3-骋贵笔-搁笔贵病毒感染
厂迟别辫5：荧光检测
结果展示
自噬流
自噬诱导剂
a)Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模拟内质网应激
b)Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chloride（氯化锂）：IMPase 抑制剂（即Inositol monophosphatase，肌醇单磷酸酶）
肠)贰补谤濒别'蝉平衡盐溶液：制造饥饿
d)N-Acetyl-D-sphingosine（C2-ceramide）：Class I PI3K Pathway抑制剂
别)搁补辫补尘测肠颈苍：尘罢翱搁抑制剂
f)Xestospongin B/C：IP3R阻滞剂
自噬抑制剂
a)3-Methyladenine（3-MA）：（Class III PI3K） hVps34 抑制剂
b)Bafilomycin A1：质子泵抑制剂
肠)贬测诲谤辞虫测肠丑濒辞谤辞辩耻颈苍别（羟氯喹）
自噬的评估通常采用多个自噬阶段的标志物，因为自噬小体数量的增加可能是自噬上调也可能是自噬阶段降解被抑制所致，所以设置合适的对照很有必要。
1. 透射电镜
2. WB检测标志物LC3/Atg8和p62/SQSTM1
3. WB检测Lamps、Atg5、Atg14和Beclin-1
4. 组织蛋白酶Cathepsin活力检测
5. IF检测自噬流auhagicflux返回搜狐，查看更多
